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Leica TCS SP5 II激光扫描共聚焦显微镜系统使用管理方案(草案)
发布日期:2012-11-14浏览次数:字号:[ ]
 

一、     开放时间

周一至周五9:0017:00

二、     预约使用

1.   至少提前一天预约,说明样品种类、测试条件及计划使用时间;活细胞及组织观察提前一周预约。

2.   按预约时间准时实验,若有变动务必于前一日事先告知取消,若无通知,迟到半小时实验取消,累计两次预约无故未使用者,停止使用两个月。

三、     仪器特点及检测项目

可以对活细胞和组织或切片进行连续扫描,获得精细的单个细胞或一群细胞的各个 层面结构三维图像对于重叠光谱进行拆分,实现荧光共定位的应用多重荧光分离及重组成像、动态时间控制及快速扫描成像、荧光和时空参数定量测定等。具体如下:

1. 原位鉴定细胞或组织内生物大分子、观察细胞及亚细胞形态结构

1)   细胞原位检测核酸

2)   原位检测蛋白质、抗体及其他分子

3)   检测细胞凋亡

4)   细胞器观察及测定

5)   观察细胞骨架

6)   检测细胞融合

7)   检测细胞内脂肪

2. 活体细胞或组织功能的实时动态监测

1)   细胞内离子动态变化的测量

2)   膜电位的测量

3)   细胞内PH值的测定

4)   检测细胞内活性氧物种的产生

5)   检测药物等跨膜进入组织或细胞过程及其定位

四、     样本准备

1. 样品经荧光标记

2. 固定的或活的组织

3. 固定的或活的贴壁培养细胞应培养在confocal专用小培养皿或盖玻片上

4. 悬浮细胞,甩片或滴片后,用盖玻片封片

5. 载玻片厚度应在0.8~1.2mm之间,盖玻片应光洁,厚度在0.17mm左右

6. 标本不能太厚,如太厚激发光大部分消耗在标本下部,而物镜直接观察到的上部不能充分激发

7. 尽量去除非特异性荧光信号

五、     结果分析

用离线电脑分析结果,至少提前一天预约。使用空白光盘刻录实验结果,不得使用任何其他形式的存储介质。

 

 

 

 

分子心血管学教育部重点实验室

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